1–4 декабря 2005 г. в Смоленске проходил семинар для бактериологов «β-лактамазы: значение и методы выявления». Место проведения семинара — Учебные лаборатории НИИ антимикробной химиотерапии ГОУ ВПО «Смоленская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Смоленск, ул. Крупской, д. 28. Участие в семинаре было бесплатным.
| 1 декабря (четверг) |
|
| Лекции |
|---|
- Разнообразие β-лактамаз. Схемы классификации, классификационные признаки:
1.1. Субстратный спектр и чувствительность к ингибиторам
1.2. Молекулярная структура
1.3. Локализация генов
1.4. Характер экспрессии
|
9.00 – 9.30 |
- Видоспецифические и приобретенные β-лактамазы. Природная и приобретённая резистентность к β-лактамам. Анализ антибиотикограмм.
|
9.30 – 10.00 |
| Перерыв |
10.00 – 10.20 |
- β-лактамазы Enterobacteriaceae и их значение
3.1. Klebsiella pneumoniae
3.2. Escherichia coli и Shigella spp.
3.3. Salmonella и Proteus mirabilis
3.4. Enterobacter spp., Citrobacter freundii, Serratia spp., Morganella morganii,
Providencia stuartii, P.rettgeri
3.5. Citrobacter diversus, Proteus vulgaris, P.penneri, Klebsiella oxytoca
|
10.20 – 11.20 |
- Особенности β-лактамаз грамотрицательных неферментирующих бактерий
4.1. Pseudomonas aeruginosa
4.2. Acinetobacter spp.
4.3. Stenotrophomonas maltophilia
|
11.20 – 12.00 |
| Перерыв |
12.00 – 14.00 |
|
| Практические занятия |
|---|
- Организация работы по выявлению и исследованию β-лактамаз в НИИАХ: экскурсия по лаборатории
|
14.00 – 14.40 |
- Выбор антибиотиков и постановка чувствительности
(контрольные, охарактеризованные клинические штаммы и штаммы, привезённые участниками)
- Выбор антибиотиков с учётом данных идентификации бактерий
- Дополнительные фенотипические тесты для выявления БЛРС, МБЛ (метод двойных дисков, использование комбинированных дисков)
- Контроль качества
|
14.40 – 16.00 |
- Хромогенные тесты для выявления β-лактамаз
|
16.00 – 16.40 |
- Постановка конъюгации (инокуляция сред)
|
16.40 – 17.00 |
|
| 2 декабря (пятница) |
|
| Лекции |
|---|
- Наиболее важные приобретённые (вторичные) β-лактамазы. Эпидемиология, методы выявления в практических лабораториях, клиническое значение.
5.1. Пенициллиназы Neisseria spp., Haemophilus spp., грам(+) кокков и
анаэробных бактерий
|
9.00 – 9.20 |
| Перерыв |
9.20 – 9.40 |
-
5.2. β-Лактамазы расширенного спектра (БЛРС) — класс A
5.3. Плазмидные цефалоспориназы (AmpC) — класс C
5.4. Металло-β-лактамазы (МБЛ) — класс B
|
9.40 – 12.00 |
| Перерыв |
12.00 – 14.00 |
|
| Практические занятия |
|---|
- Учёт и интерпретация данных определения чувствительности
(демонстрация системы Osiris: регистрация тестов, экспертная система, контроль качества)
|
14.00 – 15.00 |
- Оценка результатов фенотипических тестов на БЛРС, МБЛ
(сравнение тестов, особенности интерпретации результатов у различных видов)
|
15.00 – 15.40 |
- Интерпретация антибиотикограмм (данные МПК из БД) — интерактивный опрос
|
15.40 – 16.10 |
|
16.10 – 16.30 |
- Подведение промежуточных итогов семинара
|
16.30 – 17.00 |
Биохимические и молекулярно-генетические методы исследования β-лактамаз |
| 3 декабря (суббота) |
|
| Лекции |
|---|
- Молекулярные методы: как, когда и зачем?
|
9.00 – 9.30 |
| Перерыв |
9.30 – 10.00 |
- Характеристика β-лактамаз: возможности и ограничения различных методов
7.1. Изоэлектрическое фокусирование и определение субстратного профиля
7.2. ПЦР и real-time ПЦР
7.3. Другие методы
|
10.00 – 12.00 |
| Перерыв |
12.00 – 14.00 |
|
| Практические занятия |
|---|
- Выделение β-лактамаз и анализ с помощью изофокусирования. Интерпретация результатов
|
14.00 – 16.30 |
- Учёт результатов конъюгации
|
16.30 – 17.00 |
|
| 4 декабря (воскресенье) |
|
| Практические занятия |
|---|
- Использование ПЦР и ПЦР в реальном времени для выявления генов β-лактамаз (примеры blaCTX-M, blaIMP, blaVIM) и анализа мутаций (blaSHV)
- Выделение ДНК и подготовка амплификации
- Проведение амплификации
|
9.00 – 12.00 |
| Перерыв |
12.00 – 14.00 |
- Разбор методик. Обсуждение результатов
|
14.00 – 17.00 |
