Можно ли использовать диски для определения чувствительности, которые наша лаборатория изготавливает самостоятельно? И что делать, если диска с препаратом, который нам нужен, в промышленных масштабах не производится?
Сотрудник НИИАХ Posts: 41
Уважаемый коллега,
Если отвечать коротко, то использование дисков с антибиотиками собственного изготовления для определения чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом - НЕКОРРЕКТНО И НЕДОПУСТИМО.
Дело в том, что с учётом современных строгих требований к стандартизации процедуры определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам диско-диффузионным методом in vitro, добиться выполнения всех условий получения достоверных и воспроизводимых результатов определения чувствительности при самостоятельном изготовлении дисков с антибиотиками в лаборатории крайне сложно, очень трудоёмко и неоправданно по финансовым затратам, которые на это потребуются.
Если Вам нужно исследовать чувствительность микроорганизмов к какому-либо новому соединению с антимикробными свойстами, для которого нет дисков промышленного изготовления, то будет проще определить чувствительность с научными целями методом разведений в агаре или в бульоне. Тем более, в этом случае Вы получите значения МПК, которые являются количественным показателем чувствительности микроорганизмов к определённому антибиотику.
Следует учитывать, что для изготовления дисков должен использоваться специальный фильтровальный картон известной плотности, абсорбирующий строго определённое количество жидкости на диск, а также потом высвобождающий строго определённое количество антибиотика в агар при выполнении тестирования.
Кроме того, общепринятый диаметр такого диска - 6 мм, а диски большего диаметра обычно не используются.
При этом, недопустимо «помещать диски без антибиотика в раствор нужной конценрации антибиотика и затем выкладывать на чашки», необходимо пипеткой наносить строго определённый объём раствора, содержащий строго определённое количество антибиотика ОТДЕЛЬНО НА КАЖДЫЙ ДИСК, диски затем высушиваются на сетке в термостате при определённой температуре, а на чашки выкладываются высушенными.
Причём, обязательным является использование СУБСТАНЦИЙ АНТИБИОТИКОВ С ИЗВЕСТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, а не растворов антибиотиков, использующихся в клинической практике.
При изготовлении дисков ОБЯЗАТЕЛЬНО ПРОВЕДЕНИЕ ВНУТРЕННЕГО КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА с использованием нескольких концентраций антибиотика, тестированием набора контрольных штаммов с известными диаметрами зон подавления роста.
И последнее, даже если Вам удалось выполнить все указанные выше условия, то для интерпретации результатов определения чувствительности штаммов Вам необходимы критерии, которые устанавливаются путём сравнения значенний диаметров зон подавления роста и соответствующих значений МПК для большого числа (не менее 500) штаммов микроорганизмов различных видов с различной чувствительностью к определённому антимикробному препарату, что представляет собой отдельную дорогую и очень трудоёмкую работу.
